أساسيات تجميد الثقافات التجفيف (lyophilization)
التجفيد ، المعروف أيضا باسم التجفيف بالتجميد ، هو عملية تستخدم للحفاظ على المواد البيولوجية عن طريق إزالة المياه من العينة ، والتي تتضمن أول تجميد العينة ومن ثم تجفيفها ، تحت فراغ ، في درجات حرارة منخفضة جدا. يمكن تخزين العينات المجفدة بالتبريد لفترة أطول بكثير من العينات غير المعالجة.
لماذا يستخدم Lyophilization
يعمل التجفيد بالتبريد ، أو تجميد الثقافات البكتيرية على تجميد الثقافات ، على استقرار الثقافات للتخزين على المدى الطويل مع تقليل الضرر الناتج عن التجفيف الدقيق للعينة.
العديد من الكائنات الحية الدقيقة تبقى على قيد الحياة بشكل جيد عندما مجفف بالتجميد ويمكن بسهولة إعادة ترطيبها ونموها في وسائل الإعلام الثقافية ، بعد فترات طويلة من الوقت في التخزين.
يستخدم أيضا التجفيد في التكنولوجيا الحيوية والصناعات الطبية الحيوية للحفاظ على اللقاحات وعينات الدم والبروتينات المنقى والمواد البيولوجية الأخرى.
يمكن استخدام هذا الإجراء المخبري القصير مع أي مجفف متوفر تجاريا للحفاظ على مجموعة ثقافتك.
عملية تنجيم
إن عملية التجفيد هي في الواقع تطبيق لظاهرة فيزيائية تسمى التسامي: انتقال مادة من صلبة إلى حالة غازية ، دون المرور أولاً بمرحلة السائل. أثناء التجفيد ، يتم إزالة الماء في العينة المجمدة كبخار بالماء ، دون أول ذوبان للعينة.
الأخطاء الشائعة
أحد الأخطاء الأكثر شيوعًا عندما يتعلق الأمر بالتجفيد هو عدم معرفة نقطة انصهار عينتك ، مما يجعل من الصعب اختيار lyophilizer الصحيح.
قد تذوب العينات الخاصة بك أثناء العملية. خطأ شائع آخر هو التفكير في برودة أفضل عندما تجميد التجفيف على مجفف تجميد الرف من نوع. أثناء التجفيف الأولي ، يجب ضبط درجة حرارة الرف إلى أقل من درجة حرارة الانصهار للعينة. يجب أن يكون هناك حرارة كافية لتشجيع الجزيئات من العينة على التحرك - لكن تمنع الذوبان.
خطأ ثالث هو استخدام المعدات غير الصحيحة للعينات الخاصة بك. نظرًا لاستخدام مجففات التجميد في إعداد المجموعة ، يجب عليك معرفة ما يلي قبل شراء واحد:
- مقدار الرطوبة سيتم مجفف بالتجميد
- ما هي العينة (ودرجة حرارة الانصهار)
- كيفية استخدام مجفف التجميد بشكل صحيح
إذا لم يتم استخدام الوحدة بشكل صحيح ، فقد يؤدي ذلك إلى تدمير جميع العينات. وهو ما يقودنا إلى خطأ شائع آخر: عدم الحفاظ على مضخة التفريغ. يجب أن تكون المضخة في حالة عمل ممتازة لكي يعمل lyophilization. تشغيل المضخة مع الصابورة الغازية المفتوحة 30 دقيقة قبل وبعد العملية الجافة التجميد سيزيد من عمر المضخة. فتح الصابورة الغازية تطهير الملوثات من المضخة لمنع تلف المكونات الداخلية.يجب عليك فحص زيت المضخة في كثير من الأحيان لتغير اللون والجسيمات ، وتغيير الزيت حسب الحاجة. التغييرات الزيتية العادية تحافظ على سحب المضخة في الفراغ الأمثل أثناء عملية التجميد الجاف.
وأخيرًا ، يمكن أن يكون إمتصاص ملحقات تجفيف التجميد الخاطئة لعملية التجفيد الخاص بك خطأ كبيرًا أيضًا. هل تحتاج إلى عينة سدادة تحت فراغك؟ ثم مطلوب غرفة التوقف. هل تجميد التجفيف في قوارير؟ ثم تأكد من وجود غرفة التجفيف مع المنافذ.
من خلال تجنب الأخطاء المذكورة أعلاه ، يمكنك تقديم رعاية أفضل لمجفف التجميد والمضخة ، ولديك عينات أفضل عندما يتم تجفيف التجميد.
المراجع
اخبار لابكونكو. "أهم 5 أخطاء ارتكبت في عملية التجفيد". http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes