كما يشار إلى تحليل RFLP ، فإن التقنية تستفيد من تعدد الأشكال في الرموز الجينية الفردية. على الرغم من أن جميع أعضاء نوع ما لديهم في الأساس نفس التركيب الجيني ، إلا أن هذه الاختلافات الطفيفة تمثل اختلافات في النمط الظاهري ، مثل المظهر أو التمثيل الغذائي ، بين الأفراد.
RFLP: تحليل التقنيات والتطبيقات
تتضمن تقنية تحليل RFLP قطع منطقة معينة من الدنا مع تقلبات معروفة ، مع إنزيمات تقييد ، ثم فصل شظايا الحمض النووي عن طريق الرحلان الكهربائي للأغاروز وتحديد عدد الشظايا والأحجام النسبية.
إنزيم الانحدار هو إنزيم ، جزيء بروتين ، يقطع الحمض النووي في مواقع التقييد. في جوهرها ، يتم تقسيم عينة الحمض النووي وهضمها بواسطة إنزيمات التقييد. يتم فصل الأجزاء الناتجة وفقًا لطولها ، وسيختلف نمط أحجام الأجزاء لكل فرد يتم اختباره.
تتطلب عملية RFLP الكاملة وضع علامات التحري ، تجزئة الحمض النووي ، الكهربي ، النشاف ، التهجين ، الغسيل ، والتصوير الذاتي. يتم تصوير RFLP المكتشف باستخدام فيلم الأشعة السينية في تصوير ذاتي ، حيث يمكن مشاهدة شظايا الحمض النووي وتحليلها بعد فصلها عن بعضها عن طريق الرحلان الكهربي.
تتضمن بعض تطبيقات تحليل RFLP ما يلي:
- بصمة الحمض النووي . قد يستخدم علماء الطب الشرعي تحليل RFLP لتحديد المشتبه بهم بناء على عينات الأدلة التي تم جمعها في مشاهد الجرائم.
- أبوة. يستخدم RFLP أيضا في تحديد الأبوة أو لتعقب النسب.
- التنوع الجيني. ويمكن استخدام هذه التقنية في دراسة تطور وهجرة الحياة البرية ، ودراسة أنماط التكاثر في مجموعات الحيوانات ، وكشف وتشخيص أمراض معينة.
تعتبر تقنية استخدام اكتشاف RFLP للتغير في الجينوم أداة حيوية في رسم خريطة الجينوم وتحليل الأمراض الوراثية. إذا تم البحث عن مكان جينة مرض معين في كروموسوم معين ، فإن الباحثين سيقومون بتحليل الحمض النووي لأفراد العائلة المصابة بالمرض ، ثم يبحثون عن أنماط مماثلة من الميراث في الأليلات RFLP.
وبمجرد توطين جينة المرض ، يمكن أن يؤدي إجراء تحليل RFLP على أفراد الأسرة الآخرين إلى كشف حاملة للجينات الطافرة أو يشير إلى خطر شامل للمرض. من المهم ملاحظة أن تقنية RFLP ليست مستخدمة على نطاق واسع الآن ، حيث يتم استخدام تقنيات أحدث وأكثر قوة لتحليل الحمض النووي في علم الطب الشرعي والعديد من المجالات الأخرى.
الجانب السلبي للتحليل
لسوء الحظ ، تقنية تحليل RFLP مملة وبطيئة. وبصرف النظر عن الحاجة إلى كمية كبيرة من عينات الحمض النووي ، فإن العينة تحتاج عادة إلى أن تكون بحجم ربع الحجم ، وهو كبير نسبيا بالنسبة لعينات الحمض النووي (DNA) - فالعملية ، من وضع العلامات على الفحص إلى الغسل والتصوير الذاتي ، يمكن أن تصل إلى شهر كامل لإكمال.
لقد استبدلت نتائج مشروع الجينوم البشري إلى حد كبير الحاجة إلى RFLP. سمح المشروع بتحديد التسلسل الكامل للحمض النووي الموجود في الخلايا البشرية ، والجينوم البشري ، ولتحديد جميع الجينات في الجينوم البشري.