يستخدم هذا المخزن لدراسة حركة الحمض النووي
هذا المخزن المؤقت لديه قوة منخفضة الأيونية وانخفاض قدرة التخزين المؤقت. هو الأنسب للالكهربائي من قطع كبيرة (> 20 كيلو بايت) من الحمض النووي وسوف تحتاج إلى استبدالها بشكل متكرر أو إعادة تدويرها لفترة أطول (> 4 ساعات) هلام المدى.
مع أخذ ذلك في الاعتبار ، قد ترغب في النظر في عدة دفعات من المخزن المؤقت.
وبالنظر إلى سهولة إنشاء المخزن المؤقت والقيام بالخطوات بسرعة ، فإن إجراء أكثر من دفعة واحدة في كل مرة لا ينبغي أن يكون مستهلكًا للوقت أو يصعب إزالته. باستخدام الإرشادات أدناه ، يجب أن يستغرق الأمر 30 دقيقة فقط لإنشاء مخزن TAE المؤقت. إليك الطريقة:
إعداد حل الأسهم من EDTA
يتم تحضير محلول EDTA (حمض إيثيلينديامين تيتراسيتيك) في وقت مبكر. لن تذهب EDTA بالكامل إلى حل حتى يتم ضبط الرقم الهيدروجيني إلى حوالي 8.0. للحصول على محلول 500 ميلليتر من 0.5 EDTA ، تزن 93.05 جرام من ملح ثنائي الصوديوم EDTA (FW = 372.2). تذوب في 400 مل ماء منزوع الأيونات وضبط درجة الحموضة مع هيدروكسيد الصوديوم (NaOH). قم بتعبئة الحل النهائي بحجم 500 ملليلتر.
السوط حتى الحل الأسهم من TAE
اصنع حلاً مركباً (50x) من TAE من خلال وزن 242 غرام من قاعدة Tris (FW = 121.14) وحلها في حوالي 750 ملليلتر من الماء منزوع الأيونات.
أضف بعناية 57.1 ملليلتر من حمض الجليدية و 100 ملليلتر من 0.5 متر EDTA (الرقم الهيدروجيني 8.0). بعد ذلك ، ضبط الحل إلى الحجم النهائي من 1 لتر. يمكن تخزين هذا المخزون في درجة حرارة الغرفة. لا يتم تعديل الرقم الهيدروجيني لهذا المخزن المؤقت ويجب أن يكون حوالي 8.5.
إعداد حل العمل من TAE
يتم عمل حل المخزن المؤقت 1X TAE ببساطة عن طريق تمييع محلول المخزون بمقدار 50x في الماء منزوع الأيونات.
تركيزات المذاب النهائية هي 40 ملي. تريس خلات و 1 ملم EDTA. المخزن المؤقت جاهز الآن للاستخدام في تشغيل هلام agarose.
ما تحتاجه للعزلة
نظرًا لأن إنشاء مخزن TAE المؤقت يتطلب فقط مجموعة سريعة وبسيطة من التعليمات ، فإن عدد المواد اللازمة له ليس مفرطًا. ستحتاج فقط إلى ملح ثنائي الصوديوم EDTA ، وقاعدة تريس ، وحمض الخليك الجليدي.
يتطلب جعل المخزن المؤقت أيضًا مقياس درجة الحموضة ومعايير المعايرة ، حسب الاقتضاء. ستحتاج أيضًا إلى 600 ملليلتر و 1500 ملليلتر من الأكواب أو القوارير بالإضافة إلى الأسطوانات المتدرجة. وأخيرًا ، ستحتاج إلى الماء منزوع الأيونات والقوالب وتحريك الألواح.
تغليف
أين تخطط لجعل المخزن المؤقت - في موقع مدرسة ، أو موقع عمل ، أو موقع آخر ، مثل منزلك؟ تحقق من المخزون قبل البدء للتأكد من أن لديك جميع المواد المذكورة أعلاه لمخزن TAE المؤقت.
إذا كنت تفضل عدم دفع ثمن المواد ، فاختر جعل المخزن المؤقت خارج منزلك موصى به. يمكنك بسهولة طلب المواد التي تحتاجها عبر الإنترنت أو زيارة متجر متخصص لهم.