يستخدم عازلة سيترات الصوديوم لعزل الحمض النووي الريبي لأنه يقلل من التحلل المائي الأساسي لخلايا RNA. هذا يجعلها خطوة مهمة في تنقية mRNA خلال البحوث الجينومية أو لدراسة النسخ.
يمكن أن تساعد المخازن المؤقتة القائمة على السيترات أيضًا في اكتشاف المستضدات في المستحضرات النسيجية الثابتة لأنها تكسر الروابط المتقاطعة التي تشكلت بين المستضدات ووسائط التثبيت.
مع الدليل أدناه ، قم بعمل عازلة سيترات الصوديوم من الرقم الهيدروجيني 6. التعليمات ليست سهلة فحسب بل سريعة التنفيذ أيضا. يجب أن يستغرق الأمر منك حوالي 10 دقائق فقط لإكمال هذه الخطوات.
خياران لجعل المخزن المؤقت
هناك طريقتان للذهاب حول صنع عازلة سترات الصوديوم. أولا ، تحديد ما إذا كان لديك كل من حمض الستريك والقاعدة المترافقة ، سترات الصوديوم ، للعمل معها. إذا كان لديك فقط حامض الستريك ، فهي ليست مشكلة. لا يزال بإمكانك جعل المخزن المؤقت.
من ناحية أخرى ، إذا كان لديك كل من الحمض والقاعدة ، فأنشئ حلاً لكل سهم. مزيج 21 غراما من حمض الليمون في 1 لتر من الماء المقطر ، و 29.4 غراما من سترات الصوديوم في 1 لتر من الماء المقطر.
إذا كان لديك فقط حامض الستريك ، اخلط 2.1 جرام في أقل من لتر واحد من الماء المقطر وانتقل إلى الخطوة التالية.
خلط حمض الستريك وحلول سيترات الصوديوم
الآن بعد أن قمت بإنشاء حل المخزون الخاص بك (إذا كان لديك كل من حمض وقاعدة) أو خلط حمضك في الماء المقطر (إذا لم يكن) ، يمكنك التركيز على الحلول الخاصة بك.
خلط 82 ملليلتر من محلول حامض الستريك مع 18 ملليلتر من محلول سيترات الصوديوم.
ثم ، اجعل الحجم الكلي للخليط يصل إلى أقل بقليل من 1 ليتر بالماء المقطر. اترك الحجم الكافي للسماح بإضافة هيدروكسيد الصوديوم (NaOH) في الخطوة التالية.
ضبط الرقم الهيدروجيني
أثناء تحريك المحلول برفق باستخدام محرك مغناطيسي ، استخدم هيدروكسيد الصوديوم 1M لضبط الرقم الهيدروجيني للخليط إلى 6.0. بعد ذلك ، اجعل الحجم النهائي للحل يصل إلى 1 لتر بالماء المقطر باستخدام قارورة الحجمية.
ما تحتاجه لجعل العازلة
لن يستغرق الأمر وقتًا طويلاً فقط لجعل مخزن سيترات الصوديوم ، ولن تحتاج أيضًا إلى العديد من المواد. مع حامض الستريك ، 1M من هيدروكسيد الصوديوم ، الماء المقطر ، ودرجة الحموضة المعيارية ، ستكون في منتصف الطريق. استخدام سترات الصوديوم هو اختياري.
يتطلب صنع المخزن المؤقت أيضًا أسطوانة متدرجة سعة لترًا واحدًا وقارورة حجمية سعة لترًا واحدًا وثلاث زجاجات إعلامية سعة لترًا واحدًا. وأخيرًا ، ستحتاج إلى قضيب مغناطيسي ومحرك مغناطيسي.
إذا لم يكن لديك كل هذه المواد ، ففكر في استخدام المعمل في مدرستك أو موقع عملك ، حتى لا تضطر إلى شرائها بنفسك. يمكنك أيضًا شراء هذه المواد بسهولة عبر الإنترنت أو زيارة متجر سلع متخصصة في منطقتك.